3D灌流培養是一種細胞培養技術，其主要作用是在三維環境中模擬體內組織和器官的生理條件，以提高細胞生長、分化和功能表達。通過提供細胞所需的氧氣、營養物質和廢棄物的排出，模擬體內的血液循環環境。其主要特點包括：

　　1.三維支架：提供細胞附著和生長的支撐結構，通常由生物可降解的材料制成。

　　2.灌流系統：通過灌注培養液，維持三維結構內的流動，以促進營養物質的輸送和廢棄物的清除。

　　3.細胞分布均勻性：灌流培養系統可以確保細胞在整個三維結構中均勻分布，從而模擬更真實的組織環境。

　　4.力學刺激：通過調節灌注速度和流體剪切力等參數，可以模擬體內組織受到的力學刺激，如血流和機械壓力。

　　5.長期培養：與傳統的二維培養相比，灌流培養提供更穩定、更持久的細胞培養環境，適用于長時間的實驗和觀察。

　　3D灌流培養一般的使用流程：

　　培養基準備：根據實驗要求，準備適當的培養基，包括營養物質、生長因子等。確保培養基的配制正確，并進行無菌過濾以確保無菌狀態。

　　細胞或組織準備：根據研究目的，選擇需要培養的細胞或組織，并進行必要的處理，如細胞分離、組織切割等。確保細胞或組織的純度和活性。

　　3D培養裝置準備：準備好灌流培養所需的培養器具，如培養箱、培養皿、生物反應器等。確保裝置的清潔和無菌狀態。

　　構建3D培養結構：根據實驗設計，將細胞或組織放置在3D培養裝置中，如培養皿、生物反應器等。可以使用支架、基質或其他輔助材料來構建和支撐3D培養結構。

　　灌流培養操作：將預先準備好的培養基加入到3D培養裝置中，確保培養結構被培養基覆蓋。使用灌流裝置，通過調節流速和壓力，實現培養基在3D培養結構中的流動。根據實驗要求，可以調整灌流速度、時間和壓力等參數。

　　培養條件控制：將3D培養裝置放置在合適的培養箱或生物反應器中，維持適宜的培養條件，包括溫度、濕度和二氧化碳濃度等。根據實驗要求，可以對培養條件進行調節。

　　培養觀察和維護：定期觀察和評估3D培養結構的生長和發育情況。根據需要，可以進行培養基的更換、細胞或組織的采樣、細胞增殖或分化的調控等操作。

　　實驗結束和分析：根據實驗設計，確定實驗結束的時間點，并進行樣本采集和分析。可以使用各種細胞和組織學技術、分子生物學技術等進行結果評估和數據分析。